4 ประเภทของแอนติบอดี Monoclonal

แอนติบอดีโมโนโคลอนเป็นเครื่องมือสำคัญในภูมิคุ้มกัน ชีววิทยาโมเลกุล ชีววิทยาเซลล์ และยาแปลง การจัดกลุ่มโครงสร้างของพวกเขามีบทบาทโดยตรงในความน่าเชื่อถือของการทดสอบ ความเสี่ยงของปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน ความสะดวกในการอนุมัติ และความเป็นไปได้ในการร เมื่อเลือกรูปแบบแอนติบอดีแบบโมโนโคลอน นักวิทยาศาสตร์ต้องตรวจสอบความแม่นยำของแอนติเจน ตัวเลขความแข็งแรงในการผูก วิธีการจุดเอพิโตป ปฏิกิริยาข้าม พวกเขายังต้องคิดเกี่ยวกับการสร้างตารางและการตั้งค่าการควบคุมคุณภาพ ที่จะแนะนำผลลัพธ์ซ้ำซ้ำ ปักกิ่ง Solarbio Science & บริษัท เทคโนโลยี จำกัด ได้ทํางานในพื้นที่วิทยาศาสตร์ชีวิตตั้งแต่ปี 2004 มันทำหน้าที่เป็นองค์กรเทคโนโลยีสูงแห่งชาติที่รวม R& D การผลิต การขาย และการบริการ บริษัทได้จัดตั้งแพลตฟอร์มเต็มรูปแบบที่ครอบคลุมแอนติบอดี้, โปรตีนที่รวมกันใหม่, ชุด ELISA, ชุดทดสอบชีวเคมี, สารแก้ไขสี, มาตรฐานการวิเคราะห์, เปปไทด์, บริษัทถือ มาตรฐาน ISO 9001, ISO 13485การรับรอง ISO 14001 และ ISO 45001 มันได้สนับสนุนการพิมพ์ใหญ่เกือบ 150,000 รายการ ซึ่งรวมถึงบทความในนิตยสารเช่น NATURE MEDICINE, CELL และ CELL RESEARCH นี่แสดงให้เห็นการเติบโตทางเทคนิคและคุณภาพซ้ำของผลิตภัณฑ์ภูมิคุ้มกันของมัน

ประเภท 1: แอนติบอดี Murine Monoclonal

แอนติบอดีโมโนโคลน Murine เป็นรูปแบบแอนติบอดีที่เกิดขึ้นจากไฮบริโดมาแรกที่สุด พวกเขายังคงใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยพื้นฐานและการตรวจสอบแอนติเจนในระยะต้น เนื่องจากความเฉพาะสูงและโปรโตคอลการผลิตที่ผ่านมา

ลักษณะของแอนติบอดี Murine Monoclonal

แอนติบอดีโมโนโคลน Murine โดยการติดภูมิคุ้มกันหนู BALB / c ด้วยโปรตีนบริสุทธิ์หรือแอนติเจนเปปไทดสังเคราะห์ จากนั้นพวกเขาเก็บเกี่ยวจากหนูที่ได้รับภูมิคุ้มกัน และผสมผสานกับเซลล์มะเร็งเลือด (เช่น SP2/0) ในอัตราส่วนที่กําหนดไว้ เพื่อสร้างสายเซลล์ไฮบริโดมที่มั่นคงที่หล แอนติบอดีเหล่านี้มีภูมิภาคตัวแปรของหนูที่สมบูรณ์ (Fv) และภูมิภาคคงที่ (Fc) ซึ่งให้ความสัมพันธ์ในการผูกพันสูงกับ epitopes เป้าหมาย รวมถึงทั้ง epitopes เชิงเส้นและรูปแบบ, เฉพาะว่าสารเสริมท

ห้องปฏิบัติการมักจะตรวจสอบตัวเลขของแอนติบอดีในเซรูมผ่าน ELISA ที่ใช้โปรตีนก่อนการผสมผสานเซลล์ สายไฮบริโดมบวกถูกผ่านการ subcloning หลายรอบเพื่อให้ได้สายเซลล์ monoclonal ที่มั่นคง ตามด้วยการผลิต supernatant การปลูกและการล้างความสัมพันธ์ของแอนติบอดี

การใช้งานและข้อ จำกัด ทางเทคนิค

แอนติบอดีโมโนโคลน Murine เหมาะสำหรับ Western blot (WB), immunohistochemistry (IHC), immunofluorescence (IF) การสีสี, การวัดปริมาณ ELISA และการจัดแผนที่ epitope ในระยะต้น อย่างไรก็ตาม โครงสร้างภูมิคุ้มกันกลูบูลินในหนูทั้งหมดสามารถทําให้เกิดการตอบสนองแอนติบอดีต่อต้านหนูของมนุษย์

การพัฒนาโครงสร้างผ่านบริการแอนติบอดี้ที่กำหนดเอง

แพลตฟอร์มบริการแอนติบอดีที่กำหนดเองให้บริการพัฒนาแอนติบอดีที่กำหนดเองทั้งหมด รวมถึงการติดภูมิคุ้มกันหนู BALB / c การตรวจจับตัวแอนติบอดีในเซรูมที่ใช้ ELISA การรวมตัวของเซลล์เซลล์เซลล์เซลล์เซลล

การเตรียม antiserum อย่างรวดเร็วสามารถเสร็จสมบูรณ์ภายใน 3-4 สัปดาห์สำหรับการใช้งานที่ต้องการ antiserum polyclonal เท่านั้น การพัฒนาแอนติบอดีโมโนโคลอนที่สมบูรณ์โดยปกติจะใช้เวลาหลายเดือน ขึ้นอยู่กับการตรวจสอบและความต้องการในการตรวจสอบ ปริมาณแอนติเจนที่จําเป็นค่อนข้างต่ำ: โดยปกติแล้ว 300-500 μg ของแอนติเจนที่บริสุทธิ์เพียงพอสำหรับการติดภูมิคุ้มกันของหนู BALB / c 5 ตัว ซึ่งลดการบริโภคโปรตีนที่มีค่

ประเภท 2: แอนติบอดี Chimeric Monoclonal

เมื่อปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันกลายเป็นความกังวลในการวิจัยการแปลง แอนติบอดีโมโนโคลนัล chimeric ให้รูปแบบโครงสร้างกลางที่สมดุลความเฉพาะของการผูกต้องแอนติเจนสูงกั

แอนติบอดีโมโนโคลนัล Chimeric รักษาภูมิภาคตัวแปรของหนูที่รับผิดชอบในการรับรู้แอนติเจน ในขณะที่แทนที่ภูมิภาคคงที่ของหนูด้วยภูมิภาคคงที่ของอิม การออกแบบนี้เพิ่มอัตราส่วนโดยรวมของลำดับของมนุษย์ในแอนติบอดี้ ดังนั้นจะลดการสร้างภูมิคุ้มกันอย่างมาก

การออกแบบโครงสร้างและการพิจารณาทางภูมิคุ้มกัน

การติดต่อแอนติเจนตั้งอยู่ในภูมิภาคโซ่หนัก (VH) และแสงเบา (VL) การรักษาภูมิภาคเหล่านี้จะรักษาความเฉพาะของเอพิโตปอย่างเต็มที่ ในขณะที่การแทนที่ภูมิภาคคงที่ด้วยลำดับที่มาจากมนุษย์จะปรับฟังก์ชั่น Fc-mediated immune effector และลักษณะครึ่งชี เมื่อเทียบกับ immunoglobulins ของหนูเต็ม การปรับเปลี่ยนโครงสร้างนี้ลดความเสี่ยงของการพัฒนาแอนติบอดี้ต้านยา (ADA) อย่างมาก

ความสัมพันธ์ในการวิจัยการแปลและก่อนคลินิก

แอนติบอดีชิเมอริกถูกใช้กันอย่างแพร่หลายในการทดสอบการบล็อกตัวรับ การศึกษาการกลางไซโตคิน และรูปแบบโรค in vivo ที่ต้องการการบริหารแอนติบอดีระยะยาว ภูมิภาคคงที่เป็นมนุษยชนบางส่วนของพวกเขาปรับปรุงความเข้ากันได้กับระบบตัวรับ Fc ของมนุษย์ ในขณะที่รักษาความสัมพันธ์ในการผูกพันกับแอนติเจนเป้าหมา ประสิทธิภาพนี้ได้รับการสนับสนุนจากพอร์ตโฟลิโอที่ครอบคลุมของสารปฏิกิริยาที่สนับสนุน รวมถึงผลิตภัณฑ์แอนติบอดีมากกว่า 18,000 ชนิด และสารปฏิกิริยาโปรตีนและภูมิคุ้มกั

วิศวกรรมและการตรวจสอบ Workflow

การผลิตแอนติบอดีชิเมอริกต้องการการออกแบบการสร้างยีน การสร้างเวกเตอร์ การแสดงออกแบบรีคอมบินในระบบโฮสต์ที่เหมาะสม การล้างสะอาด และการตรวจสอบคุณภาพ (QC) อย่างเข้มงวด รวมถึงการกําหนดชื่อแอนต

ระบบการจัดการคุณภาพอย่างเป็นระบบ ครอบคลุมการวางแผนคุณภาพ การติดตามคุณภาพในกระบวนการ การตรวจสอบการยอมรับผลิตภัณฑ์เสร็จสิ้น การวิเคราะห์สาเหตุหลัก และการปรับปรุงอย่างต่อเนื่อง รับประ

ประเภท 3: แอนติบอดี Monoclonal ที่เป็นมนุษย์

แอนติบอดีโมโนโคลอนแบบมนุษย์ลดการสร้างภูมิคุ้มกันอีกต่อไป เนื่องจากมันยังคงรักษาเฉพาะภูมิภาคที่กําหนดความสมบูรณ์ (CDR) จากแอนติบอดี รูปแบบนี้มีความสำคัญโดยเฉพาะสําหรับการพัฒนาการรักษาที่ต้องการการบริหารในระยะยาวและการประเมินความปลอดภัยอย่างเข้มงวด

Cดีอาร์ การปลูกและการปรับปรุงโครงสร้าง

การปลูกถ่าย CDR หมายถึงการปลูกถ่ายวง CDR ที่ผูกต้องแอนติเจนเข้าสู่ภูมิภาคโครงสร้างภูมิคุ้มกันโกลบูลินมนุษย์ (FR) ในขณะที่รักษาสารเหลือโครงสร้างสําคัญท

การสร้างแบบ homology ในซิลิโกและการตรวจสอบการผูกพัน in vitro เป็นสิ่งที่จําเป็นเพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียความสัมพันธ์ในการผูกพันในกรอบแอนติบอดีที่เป็นมนุษย์ การทดสอบการตรวจสอบการผูกพันธ์เป็นประจำรวมถึง ELISA, Western blotting, immunohistochemistry และการตรว

การแก้ไขความกังวลเกี่ยวกับภูมิคุ้มกันและการควบคุม

แอนติบอดีโมโนโคลอนแบบมนุษย์มักจะมีปริมาณลําดับของมนุษย์มากกว่า 90% ซึ่งลดความเสี่ยงของการยอมรับภูมิคุ้มกันโฮสต์อย่างมาก การลดความมีภูมิคุ้มกันช่วยปรับปรุงความมั่นคงของยาในชีวิต รวมถึงการตีความของข้อมูลประสิทธิภาพของยาในการศึกษาก่อนคลินิกและคลินิก

สําหรับการใช้งาน in vivo การควบคุม endotoxin โดยทั่วไปจะต้องการระดับ endotoxin ต่ำกว่า 0.3 EU / mg การล้างความสัมพันธ์ผ่าน chromatography เป็นขั้นตอนที่สําคัญในกระบวนการผลิตเพื่อตอบสนองความต

การบูรณาการกับแพลตฟอร์มวิจัยกว้างขึ้น

พอร์ตโฟลิโอของสารปฏิกิริยาวิทยาศาสตร์ชีวิตที่ครอบคลุมของบริษัท รวมถึงผลิตภัณฑ์ชีววิทยาโมเลกุลมากกว่า 36,000 ผลิตภัณฑ์ชีววิทยาเซลล์มากกว่า 3,000 และชุด ELISA ข้ามสาย

การอ้างอิงของแอนติบอดีโมโนโคลอนของบริษัท (รวมถึงแอนติบอดี Anti-Histone H3 / HIST3H3 และ Anti-β-Actin) ในนิตยสารระหว่างประเทศชั้นนำแสดงให้เห็นอย่างเต็มที่ว่าความน่าเชื่อถือในการแปลของผลิตภัณฑ์แ

ประเภท 4: แอนติบอดี Monoclonal ของมนุษย์อย่างเต็มที่

แอนติบอดีโมโนโคลนอลของมนุษย์อย่างเต็มที่เป็นตัวแทนรูปแบบแอนติบอดีที่ก้าวหน้าที่สุดในแง่ของความเข้ากันได้กับภูมิค แอนติบอดีเหล่านี้ถูกสร้างขึ้นโดยใช้เทคโนโลยี รวมถึงห้องสมุดแสดงเฟจ รูปแบบสัตว์ที่เป็นมนุษย์ หรือการจัดลำดับเซลล์ B เดียว ซึ่งทั้งหมดผลิตอิม

เทคโนโลยีการสร้างและกลยุทธ์การตรวจสอบ

การแสดง Phage ทําให้สามารถเลือก in vitro จากห้องสมุดแอนติบอดีขนาดใหญ่ที่หลากหลาย รูปแบบสัตว์ที่เป็นมนุษย์ที่แสดงถึง immunoglobulin loci ของมนุษย์สนับสนุนการพัฒนา in vivo ของ repertoire แอนติบอดีของมนุษย์ที่สมบูรณ์ การจัดเรียงเซลล์ B เดียวแยกแอนติบอดีธรรมชาติของมนุษย์ ที่มาจากการตอบสนองภูมิคุ้มกันของมนุษย์ เทคโนโลยีเหล่านี้แต่ละต้องการการคัดกรองที่มีประสิทธิภาพสูง และการระบุลักษณะความสัมพันธ์ในการผูกพัน เพื่อเลือกผู้สมัครแอนติบอดีที่ด

ระบบนิเวศการพัฒนาแบบครบวงจร

การพัฒนาแอนติบอดีที่ประสบความสําเร็จต้องการการแสดงออกของแอนติเจนที่รวมกันใหม่, การสังเคราะห์เปปไทดสําหรับการจัดแผนที่ epitope, การตรวจสอบทางชีวเคมี, และการสีเนื้อเยื่อ บริการสนับสนุนทางเทคนิคแบบบูรณาการ รวมถึงการสังเคราะห์ไพร์เมอร์, การแสดงออกของโปรตีน prokaryotic, การสังเคราะห์เปปไทด์, และการพัฒนาแอนติบอดี้ที่กำหนดเอง, สร้างกระแส

การวิเคราะห์เปรียบเทียบ: วิธีการเลือกชนิดแอนติบอดี Monoclonal ที่เหมาะสม?

การเลือกรูปแบบแอนติบอดีโมโนคลอนขึ้นอยู่กับขั้นตอนการวิจัย วัตถุประสงค์การรักษา เส้นทางการอนุมัติตามกฎหมาย งบประมาณค่าใช้จ่าย และเวลาโครงการ แอนติบอดี monoclonal Murine เหมาะสำหรับการวิจัยพื้นฐานและการค้นพบ epitope แอนติบอดีชิเมอริกให้ความต่อต้านภูมิคุ้มกันลดลงสําหรับการใช้งานวิจัยการแปลง แอนติบอดีที่เป็นมนุษยชนให้โปรไฟล์ความปลอดภัยสูงขึ้นสำหรับการพัฒนาการรักษา และแอนติบอดีของมนุษย์อย่างเต็มที่เป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสําหรับการใช้งานที่ต้องการการบริหารในระยะยาวและความมีภูมิคุ้ม

ปักกิ่ง Solarbio Science & บริษัท เทคโนโลยี จำกัด เสริมกลยุทธ์เหล่านี้ด้วยระบบนิเวศวิจัยวิทยาศาสตร์ชีวิตที่สมบูรณ์ แพลตฟอร์มแบบครบวงจรของมันรวมถึงการผลิตแอนติบอดีที่กำหนดเอง - รวมถึงรูปแบบของหนู, chimeric, humanized และมนุษย์อย่างเต็มที่ - พร้อมกับการแสดงออกโปรตีนที่รวมกันใหม่, การสังเคราะห์เปปไทด์, ชุด EL ระบบการจัดการคุณภาพที่ได้รับการรับรอง ISO ของบริษัทนี้รับประกันความน่าเชื่อถือที่สม่ำเสมอ, ความเฉพาะสูง, และระดับ endotoxin ต่ำ, สนับสนุนทั้งการวิจัยและการพั

โดยการรวมการคัดกรองที่มีประสิทธิภาพสูง ท่อการตรวจสอบที่แข็งแกร่ง และบริการปรับแต่งที่ยืดหยุ่น โซลาร์บิโอ ช่วยให้นักวิจัยสามารถปรับปรุงการกระแสการทำงานของแอนติบอดีโมโนโคลน จากการออกแบบแอนติเจนไปยังการใช้งานที่มีประสิทธิภาพ วิธีการรวมนี้ไม่เพียง แต่เร่งเวลาการทดลอง แต่ยังเพิ่มความสามารถในการทำซ้ำและความมั่นใจในการแปลง ทําให้มันเป็นคู่ค้าที่จําเป็นสําหรับห้องปฏิบัติการที่มีเป้าหมาย

คำถามที่พบบ่อย

Q1: ประเภทแอนติบอดี Monoclonal ใดที่แนะนำสำหรับการตรวจสอบแอนติเจนในระยะแรก?
ตอบ: แอนติบอดีโมโนโคลน Murine เป็นตัวเลือกที่แนะนำมากที่สุดสําหรับการตรวจสอบแอนติเจนในระยะต้น นี่เป็นเพราะเทคโนโลยีไฮบริโดมทําให้มีความเฉพาะในการผูกพันสูง และสร้างสายเซลล์โมโนโคลนที่มั่นคง ที่เข้ากันได้กับการทดสอบประจำรวมถึงการบล็อตตะวันตก, ELIS

Q2: การสร้างภูมิคุ้มกันจะลดได้อย่างไรในระหว่างการพัฒนาแอนติบอดีการรักษา?
ตอบ: การสร้างภูมิคุ้มกันสามารถลดลงได้อย่างมากโดยการเปลี่ยนจากรูปแบบของหนูไปยังรูปแบบของแอนติบอดีโมโนโคลอนมนุษย์ รูปแบบเหล่านี้เพิ่มอัตราส่วนของลำดับของมนุษย์ในแอนติบอดี โดยลดความเสี่ยงของการพัฒนาแอนติบอดีต้านยา (ADA)

Q3: เวลาทั่วไปสำหรับการผลิตแอนติบอดี้ Monoclonal ของเมาส์ที่กำหนดเองคืออะไร?
ตอบ: การพัฒนาแอนติบอดี monoclonal ของเมาส์ที่กำหนดเองโดยทั่วไปรวมถึงการติดภูมิคุ้มกันสัตว์, การตรวจจับตัวแอนติบอดีในเซรั่ม, การผสมผสานเซลล์, การโคลน, และการล้างแอนติบอดี และโดยทั่

Q4: ปริมาณแอนติเจนที่จําเป็นโดยทั่วไปสําหรับการติดภูมิคุ้มกันเมาส์?
ตอบ: โดยปกติแล้ว 300-500 μg ของแอนติเจนบริสุทธิ์เพียงพอสําหรับการติดภูมิคุ้มกันของหนู BALB / c 5 คนในโครงการพัฒนาแอนติบอดีโมโนโคลนที่กำหนดเอง

Q5: การพัฒนาแอนติบอดี Monoclonal สามารถรวมกับการวิจัยอื่น ๆ ได้หรือไม่?
ตอบ: ใช่ การพัฒนาแอนติบอดีแบบโมโนโคลอนสามารถรวมกับเทคโนโลยีที่สนับสนุนได้อย่างราบรื่น รวมถึงการแสดงโปรตีนรวมใหม่, ชุด ELISA, ชุดทดสอบชีวเคมี, และระบบย้อมสีทางพยาธิวิทยา, สร้างกระแสการทำงานที่สมบูรณ์แบบ