สารไฮโดรโทรปิกคืออะไร? คู่มือภาคปฏิบัติเกี่ยวกับสารช่วยละลายในงานห้องปฏิบัติการ

สารช่วยละลายในน้ำมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการเตรียมสารเคมีสำหรับการทดลองและในห้องปฏิบัติการ สารทดสอบหลากหลายชนิด—รวมถึงสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ สีย้อม ไขมัน โปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ สารสกัดจากพืช และสารประกอบทางเภสัชกรรม—มีคุณสมบัติละลายในน้ำได้ต่ำ บางชนิดไม่ละลายในน้ำเลย บางชนิดอาจทำให้สารละลายขุ่น เกาะติดกับผนังหลอดทดลอง หรือตกตะกอนเป็นอนุภาคขนาดเล็ก ปัญหาเล็กน้อยเหล่านี้ดูเหมือนไม่เป็นอันตรายในตอนแรก แต่จะส่งผลต่อข้อมูลการทดลองและทำให้ได้ผลลัพธ์ที่ไม่น่าเชื่อถืออย่างหลีกเลี่ยงไม่ได้

นี่คือจุดที่สารละลายไฮโดรโทรปิกแสดงคุณค่าเชิงทดลองที่สำคัญอย่างแท้จริง

สารเพิ่มความสามารถในการละลายในน้ำ (Hydrotropic agent) หมายถึงส่วนประกอบเสริมตัวที่สามที่เติมลงในระบบตัวทำละลายเพื่อเพิ่มความสามารถในการละลายในน้ำของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่ละลายได้ยาก สารนี้สามารถทำปฏิกิริยากับสารประกอบเป้าหมายเพื่อสร้างสารประกอบเชิงซ้อนแบบรวมตัวที่ละลายได้ กลุ่มโมเลกุล หรือสารประกอบคล้ายเกลือ ที่สำคัญคือ สารเพิ่มความสามารถในการละลายในน้ำจะไม่เปลี่ยนแปลงโครงสร้างทางเคมีหรือกิจกรรมทางชีวภาพของสารเป้าหมาย หน้าที่หลักของมันคือการช่วยให้สารวิเคราะห์เป้าหมายกระจายตัวอย่างสม่ำเสมอและคงสภาพอยู่ได้ในสารละลายใช้งานที่เป็นน้ำ

Solarbio จัดจำหน่ายอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการครบวงจรสำหรับการวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ชีวภาพ ครอบคลุมถึงสารเคมีเกรดวิจัย ชุดทดสอบการตรวจจับ ตัวทำละลายในห้องปฏิบัติการ บัฟเฟอร์ทางชีวภาพ และวัสดุสิ้นเปลืองทั่วไปสำหรับการทดลอง หากคุณกำลังมองหาตัวทำละลาย/สารช่วยละลายที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาโปรตีน กรดนิวคลีอิก เซลล์ ไขมัน หรือการศึกษาในสัตว์ทดลอง เรามีสินค้าพร้อมให้คุณเลือก แพลตฟอร์มผลิตภัณฑ์อย่างเป็นทางการ เป็นศูนย์รวมสินค้าครบวงจรของคุณ

เหตุใดสารช่วยละลายจึงมีความสำคัญในการทดลองทางวิทยาศาสตร์ชีวภาพ

ความสามารถในการละลายที่ไม่ดีอาจทำลายข้อมูลโดยไม่รู้ตัว

ความล้มเหลวในการทดลองส่วนใหญ่ไม่ได้เกิดจากการออกแบบการวิจัยที่บกพร่อง แต่เกิดจากการละลายของตัวอย่างทดสอบไม่สมบูรณ์

ตัวอย่างเช่น สารละลายสต็อกทางเภสัชกรรมอาจดูเป็นเนื้อเดียวกันเมื่อมองด้วยตาเปล่า แต่แท้จริงแล้วอาจมีการตกตะกอนขนาดเล็กของสารประกอบเป้าหมายเกิดขึ้นแล้วโดยที่เรามองไม่เห็น สารเคมีประเภทไขมันมักจะแยกตัวและลอยอยู่บนสารละลายบัฟเฟอร์ที่เป็นน้ำ การเลือกผงซักฟอกที่ไม่เหมาะสมจะนำไปสู่การสูญเสียกิจกรรมของโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์อย่างถาวร ในขณะที่ระบบตัวทำละลายที่ไม่เข้ากันจะทำให้การย้อมสีของสีย้อมชีวภาพไม่สม่ำเสมอ

ความสามารถในการละลายของสารประกอบเป็นตัวกำหนดตัวชี้วัดหลักในการทดลองในห้องปฏิบัติการประจำวันโดยตรง ได้แก่ ความแม่นยำในการกำหนดความเข้มข้นด้วยการปิเปต ความสามารถในการทำซ้ำของการทดลอง การดูดซึมสารทดสอบในหลอดทดลอง และความเข้ากันได้ทางชีวภาพกับเซลล์เพาะเลี้ยง โปรตีน และชีวโมเลกุลขนาดใหญ่ ด้วยเหตุนี้ การเลือกตัวทำละลายและสารช่วยละลายจึงต้องผ่านการคัดกรองอย่างเข้มงวดและไม่ควรมองข้ามว่าเป็นรายละเอียดเล็กน้อยในการทดลอง

หากคุณทำการทดสอบทางวิทยาศาสตร์ชีวภาพหลากหลายประเภท ศูนย์โซลูชันทางเทคนิคของ Solarbio นำเสนอคำแนะนำการจับคู่สารเคมีที่ปรับแต่งให้เหมาะสมกับความต้องการในการทดลองเฉพาะของคุณ

สารละลายที่ดีไม่ควรไปรบกวนระบบ

สารช่วยละลายแบบไฮโดรโทรปิกคุณภาพสูงสามารถเพิ่มความสามารถในการละลายของสารประกอบโดยไม่รบกวนระบบการทดลองของคุณ: จะไม่ทำให้โครงสร้างโปรตีนเสียสภาพเมื่อต้องการรักษาการทำงานของโปรตีนตามธรรมชาติ จะไม่ทำให้เยื่อหุ้มเซลล์ที่สมบูรณ์เสียหายสำหรับการทดสอบในเซลล์ที่มีชีวิต และจะไม่ก่อให้เกิดการรบกวนสัญญาณในขั้นตอนการตรวจจับขั้นต่อไป

ปริมาณการใช้ก็มีความสำคัญเช่นกัน การใช้สารละลายมากเกินไปไม่ได้หมายความว่าจะดีกว่าเสมอไป ความเข้มข้นของสารลดแรงตึงผิวที่สูงอาจช่วยละลายไขมันได้ดี แต่ก็อาจทำลายเยื่อหุ้มเซลล์หรือทำให้โปรตีนเสียสภาพได้เช่นกัน

ประเภทหลักของสารไฮโดรโทรปิกและสารช่วยละลาย

ซีรี่ส์ PEG

PEG300 และ PEG400 เป็นสารช่วยละลายที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยทางเภสัชกรรมและวิทยาศาสตร์ชีวภาพ โพลีเอทิลีนไกลคอล (PEG) ช่วยเพิ่มความสามารถในการละลายในน้ำของสารประกอบที่มีคุณสมบัติชอบไขมันสูงและละลายน้ำได้ยากอย่างมาก นอกจากนี้ยังมีการประยุกต์ใช้มากมายในการสร้างตัวนำส่งยา การตรึงเอนไซม์ และการปรับเปลี่ยนพื้นผิวของวัสดุพอลิเมอร์ชีวการแพทย์

PEG400 ทำหน้าที่เป็นตัวนำส่งยาแบบฉีด/รับประทานสำหรับสารประกอบทางเภสัชกรรมที่มีคุณสมบัติชอบไขมัน (เช่น แพคลิแท็กเซล) ในการศึกษาในสัตว์ทดลอง สำหรับสารประกอบที่มีความละลายในน้ำต่ำมาก PEG400 จะช่วยรักษาเสถียรภาพของสารละลายตั้งต้นที่ให้ยาอย่างสม่ำเสมอและป้องกันการตกตะกอนระหว่างการให้ยาในสัตว์ทดลอง

Solarbio มีผลิตภัณฑ์ PEG ที่เข้ากันได้: รหัสสินค้า IP9020 พีจี300 และหมายเลขแคตตาล็อก IP9000 PEG400 ทั้งสองชนิดทำหน้าที่เป็นตัวทำละลายและตัวทำละลายร่วมที่เชื่อถือได้สำหรับการเตรียมสารละลายสต็อกของสารประกอบในกระบวนการวิจัยต่างๆ คุณสามารถดูรายละเอียดทั้งหมด พารามิเตอร์ความบริสุทธิ์ และข้อกำหนดในการจัดเก็บได้ที่เว็บไซต์ของเรา หน้าแสดงรายการสินค้าอย่างเป็นทางการ.

ซีรี่ส์ไซโคลเดกซ์ทริน

ไซโคลเดกซ์ทรินออกฤทธิ์ในการเพิ่มการละลายโดยการสร้างสารประกอบเชิงซ้อนแบบโฮสต์-เกสต์กับโมเลกุลอินทรีย์ที่ชอบไขมัน ซึ่งช่วยเพิ่มการละลายในน้ำและความเสถียรทางเคมีของสารเป้าหมายได้อย่างมาก ในการวิจัยด้านเภสัชกรรมและสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ สารละลายไซโคลเดกซ์ทรินเป็นทางเลือกที่อ่อนโยนกว่าตัวทำละลายอินทรีย์ที่รุนแรงสำหรับสารวิเคราะห์ที่ละลายน้ำได้ไม่ดีซึ่งต้องมีการบ่มในระบบชีวภาพ

หมายเลขแคตตาล็อกของเรา IH9000 (2-ไฮดรอกซีโพรพิล)-β-ไซโคลเด็กซ์ตริน (HP-β-CD) ผลิตภัณฑ์หลักของเราคือ ไซโคลเดกซ์ทริน โซลวิซิเอเตอร์ ช่วยละลายสารประกอบที่ละลายได้ยากได้อย่างมีประสิทธิภาพ และเป็นสารทดแทนตัวทำละลายอินทรีย์ที่เป็นพิษอย่างอ่อนโยนในการทดลองทางเซลล์และชีวเคมี

สารลดแรงตึงผิว

Tween-20, Tween 80, Triton X-100 และ SDS เป็นสารลดแรงตึงผิวหลักสี่ชนิดที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการ แต่ไม่สามารถใช้แทนกันได้โดยพลการสำหรับวัตถุประสงค์การทดลองที่แตกต่างกัน

Tween 80 และ Triton X-100 สามารถรวมตัวกันเองเป็นโครงสร้างไมเซลล์เพื่อห่อหุ้มลิปิดและโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์สำหรับการวิเคราะห์ในขั้นตอนต่อไป ในบรรดาสารทั้งสองนี้ Triton X-100 เป็นผงซักฟอกที่ไม่แตกตัวเป็นไอออนที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดสำหรับการสกัดโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ Solarbio จัดจำหน่าย Tween และ Triton X-100 หลายเกรดที่ตรงกับมาตรฐานโปรโตคอลการวิจัยระดับโลก สำหรับขั้นตอนการล้างด้วยบัฟเฟอร์และการกระจายตัวของตัวอย่างอย่างอ่อนโยนที่หลีกเลี่ยงการแตกตัวของเยื่อหุ้มเซลล์อย่างรุนแรง Cat.No. ของเรา... ไอที9010 Tween-20 ทำหน้าที่เป็นสารลดแรงตึงผิวแบบไม่มีประจุอย่างอ่อนโยน โดยก่อให้เกิดความเสียหายต่อโมเลกุลชีวภาพน้อยที่สุด

SDS เป็นผงซักฟอกไอออนิกชนิดแรงที่ทำให้โปรตีนเสียสภาพ มันสามารถละลายโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์และเปปไทด์ที่ไม่ชอบน้ำได้อย่างมีประสิทธิภาพ อย่างไรก็ตาม นักวิจัยต้องใช้ความระมัดระวังอย่างยิ่งในการทดสอบกิจกรรมของโปรตีนในสภาพธรรมชาติ เนื่องจากมันจะทำลายโครงสร้างตติยภูมิและจตุรภูมิของโปรตีนตามธรรมชาติอย่างสมบูรณ์และทำให้กิจกรรมทางชีวภาพหายไป

หากคุณต้องการติดตามข้อมูลล่าสุดเกี่ยวกับระเบียบวิธีการทดลองและเอกสารทางเทคนิคของผลิตภัณฑ์ โปรดเรียกดูที่นี่ ศูนย์ข่าวโซลาร์ไบโอ เพื่อขอคำแนะนำจากผู้เชี่ยวชาญในห้องปฏิบัติการเพิ่มเติม

น้ำมันและระบบตัวทำละลายอื่นๆ

น้ำมันข้าวโพดและน้ำมันมะกอกเป็นตัวนำพาในเฟสของเหลวที่เหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับสารทดสอบที่มีคุณสมบัติชอบไขมันสูง โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการให้ยาในสัตว์ทดลอง พวกมันทำหน้าที่เป็นตัวนำพาที่ปลอดภัยสำหรับสารเภสัชกรรมที่ไม่ละลายในน้ำโดยสมบูรณ์ (หมายเลขแคตตาล็อกของ Solarbio) อุปกรณ์ IC9000 น้ำมันข้าวโพดและน้ำมันมะกอก Cat.No. IO9000 เป็นน้ำมันคุณภาพสูงที่ได้รับการออกแบบมาเพื่อใช้ในการศึกษาในสัตว์โดยเฉพาะ

กลีเซอรอลเป็นสารเคมีอเนกประสงค์อีกชนิดหนึ่งที่ใช้ในห้องปฏิบัติการ หมายเลขแคตตาล็อกของเรา IG0910 กลีเซอรอลทำหน้าที่เป็นสารช่วยคงสภาพของชีวโมเลกุลขนาดใหญ่ สารปกป้องเซลล์จากความเย็น หรือตัวทำละลายร่วม โดยการใช้งานจะขึ้นอยู่กับความเข้มข้นที่ใช้และขั้นตอนการทดลอง เราแนะนำให้เลือกใช้สารเคมีโดยพิจารณาจากข้อกำหนดของการทดสอบเป็นหลัก มากกว่าการใช้งานตามปกติ

วิธีการเลือกตัวทำละลายสำหรับการทดลองเกี่ยวกับโปรตีน

การทำงานของโปรตีนต้องการสภาพแวดล้อมที่เสถียร

การทดสอบการทำงานของโปรตีนมีความไวต่อปัจจัยแวดล้อมสูงมาก รวมถึงค่า pH ความแรงของไอออน อุณหภูมิ และความเข้มข้นของสารซักฟอก หากเป้าหมายของการทดลองคือการรักษาการทำงานทางชีวภาพของโปรตีนให้คงสภาพเดิม การเลือกใช้ระบบบัฟเฟอร์ทางชีวภาพที่เหมาะสมจึงควรเป็นสิ่งแรกที่คุณพิจารณาเสมอ

บัฟเฟอร์ PBS เป็นที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลายเนื่องจากมีค่า pH ที่ใกล้เคียงกับสภาวะทางสรีรวิทยา ซึ่งจำลองสภาพแวดล้อมทางชีวภาพในร่างกาย บัฟเฟอร์ Tris-HCl เป็นบัฟเฟอร์ที่ใช้ได้หลากหลายสถานการณ์ เช่น การจัดการตัวอย่างโปรตีน การล้างเซลล์ การย้อมสีด้วยอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ การแยกกรดนิวคลีอิกด้วยไฟฟ้า และการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนด้วยวิธีโครมาโทกราฟี

สำหรับโปรตีนที่ไวต่อการเสียสภาพ ควรหลีกเลี่ยงสภาวะการละลายที่รุนแรง เว้นแต่จะระบุไว้อย่างชัดเจนในขั้นตอนการปฏิบัติงานมาตรฐาน (SOP) เกณฑ์หลักในการเลือกตัวทำละลายคือการปกป้องการทำงานของโปรตีนในสภาพดั้งเดิม ไม่ใช่เพียงแค่บังคับให้ตัวอย่างละลายหมด

การทำให้โปรตีนบริสุทธิ์อาจต้องใช้ผงซักฟอกชนิดอ่อน

สารซักฟอกชนิดอ่อนที่ไม่แตกตัวเป็นไอออนหลายชนิดเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ เนื่องจากสามารถละลายชั้นไขมันและแยกโปรตีนเป้าหมายออกจากสภาพแวดล้อมจุลภาคของไขมันดั้งเดิมได้ ไทรทัน เอ็กซ์-100 เป็นทางเลือกที่เป็นตัวอย่าง: มันละลายส่วนประกอบไขมันของเยื่อหุ้มเซลล์เพื่อสกัดโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์แบบสมบูรณ์ แต่การสูญเสียฤทธิ์ทางชีวภาพของโปรตีนบางส่วนอาจเกิดขึ้นในระหว่างกระบวนการ

แม้แต่ผงซักฟอกชนิดอ่อนก็ยังต้องมีการปรับความเข้มข้นให้เหมาะสม: ปริมาณที่ไม่เพียงพอจะไม่สามารถสกัดโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์เป้าหมายได้อย่างเต็มที่ ในขณะที่ปริมาณที่มากเกินไปจะทำให้กิจกรรมของโปรตีนลดลงและรบกวนการทดสอบการตรวจจับในขั้นตอนต่อไป

หากคุณกำลังทำงานกับกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ที่ซับซ้อนหลายขั้นตอน ผลิตภัณฑ์ของเราเหมาะสำหรับคุณ ฝ่ายสนับสนุนด้านเทคนิคของ Solarbio ทีมงานสามารถให้คำแนะนำเกี่ยวกับการจับคู่สารเคมีที่เหมาะสมและการปรับปรุงวิธีการทดลองให้เหมาะสมได้

วิธีการเลือกตัวทำละลายสำหรับการทดลองเกี่ยวกับกรดนิวคลีอิก

การสกัดขึ้นอยู่กับการแยกเฟส

โดยทั่วไปแล้ว การสกัดกรดนิวคลีอิกจากเซลล์จะใช้สารสกัดผสมฟีนอล-คลอโรฟอร์ม ฟีนอลจะทำให้โปรตีนในเซลล์เสียสภาพและละลายได้ ในขณะที่คลอโรฟอร์มจะเร่งการแยกเฟสของเหลวสองเฟส หลังจากปั่นเหวี่ยง โปรตีนที่เสียสภาพแล้วจะแยกตัวไปอยู่ในเฟสอินทรีย์หรือสะสมอยู่ที่ส่วนติดต่อระหว่างสองเฟส และกรดนิวคลีอิกจะยังคงละลายอยู่ในเฟสของเหลวส่วนบนอย่างเสถียร

กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ของกรดนิวคลีอิกส่วนใหญ่ประกอบด้วยขั้นตอนต่อเนื่อง ได้แก่ การผสม การแยกเฟส และปฏิกิริยาเคมี ทุกขั้นตอนต้องดำเนินการอย่างแม่นยำเพื่อให้ได้ปริมาณกรดนิวคลีอิกที่สกัดได้มากที่สุดและมีความบริสุทธิ์สูง การผสมด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยงที่ไม่เพียงพอ อัตราส่วนปริมาตรของสารเคมีที่ไม่ตรงกัน และการแยกเฟสที่ไม่สมบูรณ์ ล้วนส่งผลให้ได้ผลผลิตการสกัดต่ำและกรดนิวคลีอิกมีความบริสุทธิ์ต่ำ

กระบวนการ PCR และการไฮบริดไดเซชันต้องการบัฟเฟอร์ที่มีความเสถียร

ปฏิกิริยา PCR ใช้ระบบบัฟเฟอร์ Tris-HCl เนื่องจากสภาพแวดล้อมที่มีค่า pH คงที่นั้นจำเป็นต่อการรักษาการทำงานของเอนไซม์ DNA polymerase ที่ทนความร้อนได้ การทดลองการผสมพันธุ์ของกรดนิวคลีอิกมักใช้บัฟเฟอร์ตระกูล SSC เพื่อควบคุมความเข้มข้นของไอออนในระบบและรับประกันการจับคู่เบสที่ถูกต้องระหว่างลำดับเป้าหมายและลำดับโพรบ

ในการทดสอบกรดนิวคลีอิก บัฟเฟอร์มีบทบาทมากกว่าแค่เป็นตัวนำของเหลวธรรมดา บัฟเฟอร์ยังช่วยสร้างและรักษาเสถียรภาพของสภาพแวดล้อมทางเคมีระดับจุลภาคที่เหมาะสม ซึ่งจำเป็นต่อปฏิกิริยาของโมเลกุลเป้าหมาย

หากคุณต้องการศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างการเลือกตัวทำละลายและกลไกทางชีวโมเลกุล คุณสามารถตรวจสอบคลังทรัพยากรการวิเคราะห์เส้นทางได้ที่นี่ เว็บไซต์อย่างเป็นทางการของ Solarbio.

วิธีการเลือกตัวทำละลายสำหรับการทดลองกับเซลล์

การเพาะเลี้ยงเซลล์ต้องอาศัยความเข้ากันได้ก่อนเป็นอันดับแรก

DMEM เป็นสารละลายพื้นฐานในน้ำที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม โดยเสริมด้วยกรดอะมิโน วิตามิน เกลืออนินทรีย์ กลูโคส และสารอาหารที่จำเป็นอื่นๆ เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์ สำหรับการทดสอบการเพาะเลี้ยงเซลล์ทั้งหมด ระบบตัวทำละลาย/ตัวพาต้องมีความเข้ากันได้ทางชีวภาพสูงกับเซลล์ที่มีชีวิต

DMSO เป็นตัวทำละลายมาตรฐานที่ใช้ในการเตรียมสารละลายเข้มข้นของสารประกอบโมเลกุลขนาดเล็กที่มีความละลายต่ำสำหรับการบำบัดเซลล์ การควบคุมความเข้มข้นของ DMSO ในอาหารเลี้ยงเซลล์อย่างเข้มงวดเป็นสิ่งจำเป็น: เซลล์ส่วนใหญ่ทนต่อการเติม DMSO ในปริมาณน้อยได้ แต่ความเข้มข้นที่สูงเกินไปจะลดความสามารถในการอยู่รอดของเซลล์และทำให้เกิดความคลาดเคลื่อนในการทดลอง

การแช่แข็งเซลล์จำเป็นต้องใช้สารป้องกันความเย็น

DMSO ยังทำหน้าที่เป็นสารเติมแต่งหลักในการปกป้องเซลล์จากการแช่แข็งในสารละลายสำหรับการแช่แข็งเซลล์ มันช่วยยับยั้งการก่อตัวของผลึกน้ำแข็งภายในเซลล์ที่มีคมภายใต้สภาวะอุณหภูมิต่ำมาก สูตรการแช่แข็งเซลล์แบบดั้งเดิมประกอบด้วย DMSO 10% เจือจางในซีรั่มจากลูกวัว (FBS) หรือสารละลายพื้นฐานสำหรับการแช่แข็งเซลล์ชนิดพิเศษอื่นๆ

แม้ว่า DMSO จะช่วยปกป้องเซลล์จากความเสียหายระหว่างการแช่แข็ง แต่การบ่มเซลล์ในอุณหภูมิห้องเป็นเวลานานจะทำให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์อย่างรุนแรง เราขอแนะนำให้ดำเนินการขั้นตอนการทำความเย็นและการแช่แข็งให้เสร็จสิ้นทันทีหลังจากผสม DMSO ลงในสารละลายเซลล์แล้ว

วิธีการเลือกตัวทำละลายสำหรับการทดลองเกี่ยวกับไขมัน

การสกัดไขมันจำเป็นต้องใช้ตัวทำละลายอินทรีย์

ลิปิดเป็นโมเลกุลชีวภาพที่ไม่มีขั้วและละลายน้ำได้น้อยมาก จำเป็นต้องใช้สารสกัดอินทรีย์เพื่อแยกลิปิดทั้งหมดออกจากตัวอย่างเนื้อเยื่อสัตว์และพืช ในบรรดาตัวทำละลายสกัดลิปิดทั้งหมด สารละลายผสมคลอโรฟอร์ม-เมทานอลถือเป็นมาตรฐานที่ดีที่สุด เนื่องจากสามารถสกัดลิปิดชนิดต่างๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในขณะเดียวกันก็กำจัดโปรตีนและโมเลกุลชีวภาพที่ละลายน้ำได้ซึ่งปนเปื้อนอยู่ในสารสกัดลิปิดดิบออกไปได้ด้วย

คลอโรฟอร์มและเมทานอลเป็นตัวทำละลายสากลสำหรับการผลิตไลโปโซมเช่นกัน โดยสามารถละลายวัตถุดิบไขมันได้อย่างสมบูรณ์ก่อนการระเหยของฟิล์มไขมันและขั้นตอนการเติมน้ำในภายหลัง

การวิเคราะห์กรดไขมันมักใช้เฮกเซน

เอ็น-เฮกเซนเป็นสารสกัดที่นิยมใช้สำหรับการวิเคราะห์โปรไฟล์กรดไขมัน เนื่องจากสามารถสกัดกรดไขมันอิสระได้อย่างมีประสิทธิภาพและก่อให้เกิดการรบกวนพื้นหลังน้อยที่สุดในการตรวจจับด้วยแก๊สโครมาโทกราฟี (GC) หลักการสำคัญในการคัดเลือกตัวทำละลายในการสกัดคือ การละลายสารเป้าหมายได้อย่างสมบูรณ์และความเข้ากันได้อย่างสมบูรณ์กับเครื่องมือวิเคราะห์ในขั้นตอนถัดไป

วิธีการเลือกตัวทำละลายสำหรับการทดลองกับสัตว์

การเลือกยานพาหนะต้องสอดคล้องกับสารประกอบ ชนิด และเส้นทาง

การศึกษาในสัตว์ทดลองในร่างกายจำเป็นต้องมีการคัดกรองตัวทำละลายอย่างเข้มงวดมากขึ้น เนื่องจากตัวนำส่งทั้งหมดจะทำปฏิกิริยาโดยตรงกับสิ่งมีชีวิตที่ยังมีชีวิตอยู่ คุณสมบัติทางกายภาพและเคมีของสารประกอบเป็นปัจจัยหลักในการคัดกรอง สำหรับสารประกอบทดสอบที่มีคุณสมบัติชอบไขมันสูง PEG400 น้ำมันข้าวโพด หรือน้ำมันมะกอก เป็นตัวนำส่งที่นิยมใช้กัน

ความแตกต่างระหว่างสัตว์แต่ละชนิดยังเป็นตัวกำหนดความทนทานต่อตัวทำละลายด้วย โดยทั่วไปแล้วหนูจะทนต่อการสัมผัส DMSO ในปริมาณต่ำได้ดีกว่าสัตว์ทดลองชนิดอื่นๆ วิธีการให้ยาเป็นอีกปัจจัยสำคัญเช่นกัน การให้ยาทางปาก การฉีดเข้ากล้ามเนื้อ การฉีดเข้าเส้นเลือด และวิธีการให้ยาอื่นๆ มีมาตรฐานความปลอดภัยและข้อจำกัดของตัวทำละลายที่แตกต่างกัน

สารละลายโซเดียมคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส (CMC-Na) ในน้ำ เป็นสารแขวนลอยมาตรฐานสำหรับการป้อนยาทางปากสำหรับสารประกอบที่มีความละลายต่ำ สำหรับการให้ยาโดยการฉีด สารแขวนลอยต้องเป็นไปตามเกณฑ์ความปลอดภัยที่เข้มงวดซึ่งสอดคล้องกับวิธีการฉีดแต่ละแบบ หากคุณต้องการคำปรึกษาทางเทคนิคจากผู้เชี่ยวชาญก่อนการจัดซื้อสารเคมี คุณสามารถติดต่อทีมงานด้านเทคนิคของเราได้ทางช่องทางอย่างเป็นทางการ หน้าติดต่อของ Solarbio.

ผลิตภัณฑ์เสริมการละลายที่เกี่ยวข้องจาก Solarbio

Solarbio นำเสนอผลิตภัณฑ์สารละลายครบวงจร ครอบคลุมทั้งสารไฮโดรโทรปิก สารลดแรงตึงผิวแบบไม่มีประจุ/ประจุลบ สารนำส่งในเฟสน้ำมัน และสารทำให้คงตัวทางชีวโมเลกุล สำหรับงานวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ชีวภาพกระแสหลักทั้งหมด ผลิตภัณฑ์สารละลายหลักของเราประกอบด้วย: Cat.No.: IP9020 PEG300, IT9010 Tween-20, IC9000 น้ำมันข้าวโพด, IT9100 Triton X-100, IT9000 Tween 80, IH9000 (2-Hydroxypropyl) -β-cyclodextrin, IG0910 กลีเซอรอล, IO9000 น้ำมันมะกอก และ IP9000 PEG400

PEG300 และ PEG400 เป็นตัวทำละลายร่วมสากลสำหรับสารประกอบที่มีความสามารถในการละลายในน้ำต่ำ; Tween-20, Tween 80 และ Triton X-100 จัดเป็นสารลดแรงตึงผิวเกรดห้องปฏิบัติการ; น้ำมันข้าวโพดและน้ำมันมะกอกทำหน้าที่เป็นตัวนำส่งแบบชอบไขมันสำหรับการทดสอบในสัตว์; กลีเซอรอลทำหน้าที่เป็นสารทำให้คงตัวของโมเลกุลชีวภาพขนาดใหญ่แบบอเนกประสงค์และสารเติมแต่งป้องกันการแข็งตัว

บริษัท Solarbio ก่อตั้งขึ้นในปี 2547 เชี่ยวชาญในการพัฒนาและผลิตระบบรีเอเจนต์สำหรับการวิจัยแบบครบวงจร ครอบคลุมด้านภูมิคุ้มกันวิทยา ชีววิทยาของเซลล์ ชีววิทยาระดับโมเลกุล และชีวเคมี คุณสามารถดูรายละเอียดเพิ่มเติมเกี่ยวกับแบรนด์และการผลิตได้ที่หน้า "เกี่ยวกับเรา" บนเว็บไซต์อย่างเป็นทางการของเรา.

ข้อสรุป

สารช่วยละลายแบบไฮโดรโทรปิกมักถูกมองข้ามเป็นส่วนประกอบเล็กน้อยในสูตรการทดลอง แต่กลับมีผลกระทบอย่างมากต่อความสำเร็จโดยรวมของการทดลอง สารเหล่านี้ช่วยละลายสารทดสอบที่ละลายน้ำได้ไม่ดี ทำให้การเตรียมสูตรยาทำได้ง่ายขึ้น อำนวยความสะดวกในการประมวลผลตัวอย่างโปรตีนและไขมัน และทำให้ขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิจัยในเซลล์และสัตว์ทดลองเป็นมาตรฐานเดียวกัน

การเลือกใช้สารละลายไม่ควรอาศัยเพียงแค่การใช้งานในห้องปฏิบัติการตามปกติเท่านั้น ต้องประเมินปัจจัยหลายอย่างอย่างรอบด้าน ได้แก่ คุณสมบัติทางกายภาพและเคมีของสารประกอบ ชนิดของเมทริกซ์ตัวอย่าง ระบบชีวภาพในการทดลอง แพลตฟอร์มการตรวจจับขั้นต่อไป และขีดจำกัดความปลอดภัยสูงสุดในการเข้ากันได้ทางชีวภาพ สารละลายแต่ละชนิด รวมถึง PEG300, PEG400, Tween-20, Tween 80, Triton X-100, SDS, HP-β-CD, กลีเซอรอล, น้ำมันข้าวโพด และน้ำมันมะกอก มีสถานการณ์การใช้งานที่เหมาะสมเฉพาะของตนเอง

การเลือกใช้สารละลายที่เหมาะสมที่สุดกับความต้องการในการทดลองของคุณ จะช่วยให้ได้พื้นหลังการวิเคราะห์ที่สะอาดกว่า มีความสามารถในการทำซ้ำการทดลองได้ดีกว่า และหลีกเลี่ยงความล้มเหลวในการทดลองที่ไม่จำเป็นซึ่งเกิดจากการละลายตัวอย่างไม่สมบูรณ์

คำถามที่พบบ่อย

คำถามที่ 1: สารไฮโดรโทรปิกคืออะไรกันแน่?
A1: สารเพิ่มความสามารถในการละลายในน้ำ (hydrotropic agent) คือสารเสริมที่เติมลงในระบบตัวทำละลายเพื่อเพิ่มความสามารถในการละลายในน้ำของสารวิเคราะห์ที่ละลายได้ยาก สารนี้จะทำปฏิกิริยากับโมเลกุลเป้าหมายเพื่อสร้างสารประกอบเชิงซ้อนแบบรวมตัวที่ละลายได้ สารประกอบเชิงซ้อนระดับโมเลกุล หรือสารประกอบคล้ายเกลือ

คำถามที่ 2: สารไฮโดรโทรปิกเทียบเท่ากับสารลดแรงตึงผิวหรือไม่?
A2: แนวคิดทั้งสองอย่างนี้ไม่สามารถใช้แทนกันได้ สารลดแรงตึงผิวบางชนิดสามารถทำหน้าที่เป็นตัวละลายได้ แต่สารไฮโดรโทรปิกและสารลดแรงตึงผิวมีความแตกต่างกันอย่างพื้นฐานในกลไกการละลายและช่วงความเข้มข้นที่ใช้งานได้

Q3: สถานการณ์ทดลองใดบ้างที่ต้องใช้ PEG400?
A3: PEG400 เป็นตัวทำละลายร่วมที่นิยมใช้สำหรับสารประกอบที่มีคุณสมบัติชอบไขมันสูงและละลายน้ำได้น้อย โดยใช้กันอย่างแพร่หลายในการเตรียมสูตรยาและการบริหารยาในสัตว์ทดลอง การใช้งานขั้นสุดท้ายขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของสารประกอบและวิธีการนำส่งยา

คำถามที่ 4: การใช้งานหลักของ Tween 80 คืออะไร?
A4: Tween 80 เป็นสารลดแรงตึงผิวและสารละลายชนิดไม่ประจุไฟฟ้าอ่อนๆ ที่ช่วยกระจายโมเลกุลขนาดเล็กที่ชอบไขมันอย่างสม่ำเสมอภายในระบบบัฟเฟอร์ที่เป็นน้ำ

Q5: Triton X-100 เหมาะสำหรับใช้งานอะไรบ้าง?
A5: ไตรตัน เอ็กซ์-100 เป็นสารซักฟอกหลักที่ใช้ในการละลายส่วนประกอบของเยื่อหุ้มเซลล์ไขมันและสกัดโปรตีนในเยื่อหุ้มเซลล์ จำเป็นต้องควบคุมความเข้มข้นอย่างเข้มงวด เนื่องจากปริมาณที่มากเกินไปจะทำให้การทำงานทางชีวภาพของโปรตีนดั้งเดิมลดลง

คำถามที่ 6: เหตุใด SDS จึงถูกจัดว่าเป็นผงซักฟอกที่มีฤทธิ์กัดกร่อน?
A6: SDS เป็นสารลดแรงตึงผิวไอออนิกที่มีฤทธิ์ทำลายโครงสร้างอย่างรุนแรง แม้ว่าจะสามารถละลายโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์และเปปไทด์ที่ไม่ชอบน้ำได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่ก็ทำลายโครงสร้างตติยภูมิและจตุรภูมิของโปรตีนดั้งเดิมอย่างสิ้นเชิงและทำให้สูญเสียฤทธิ์ทางชีวภาพ

Q7: DMSO สามารถนำมาใช้ในการทดลองเพาะเลี้ยงเซลล์ได้หรือไม่?
A7: ใช่แล้ว DMSO มีประโยชน์หลักสองประการในห้องปฏิบัติการ ได้แก่ การเตรียมสารละลายเข้มข้นของสารประกอบที่ละลายได้น้อย และการเตรียมสารละลายสำหรับเก็บรักษาเซลล์ด้วยความเย็น สำหรับการทดสอบการทำงานของเซลล์ที่มีชีวิต ควรควบคุมความเข้มข้นของ DMSO ให้ต่ำและคงที่ในทุกกลุ่มตัวอย่างและกลุ่มควบคุม

Q8: เหตุใดเราจึงเลือกใช้น้ำมันข้าวโพดและน้ำมันมะกอกในการศึกษาทดลองในสัตว์?
A8: น้ำมันข้าวโพดและน้ำมันมะกอกเป็นตัวนำส่งสารประกอบที่มีคุณสมบัติชอบไขมันสูง ซึ่งไม่สามารถละลายได้อย่างสมบูรณ์ในระบบบัฟเฟอร์ที่เป็นน้ำ และเข้ากันได้ทางชีวภาพในรูปของน้ำมัน

Q9: จะคัดเลือกสารละลายที่เหมาะสมสำหรับการทดลองที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนได้อย่างไร?
A9: ให้ความสำคัญกับบัฟเฟอร์และผงซักฟอกอ่อนๆ ที่ช่วยรักษาเสถียรภาพและฤทธิ์ทางชีวภาพของโปรตีนดั้งเดิม PBS, Tris-HCl และผงซักฟอกที่ไม่แตกตัวเป็นไอออนความเข้มข้นต่ำ เป็นตัวเลือกเสริมที่เหมาะสมกับจุดประสงค์การทดลองของคุณ

Q10: จะกำจัดสิ่งรบกวนในการทดลองที่เกิดจากตัวทำละลายได้อย่างไร?
A10: มาตรการสำคัญสามประการ ได้แก่ ควบคุมความเข้มข้นของสารละลายอย่างเข้มงวด ตรวจสอบความเข้ากันได้ของสารเคมีกับตัวอย่างและแพลตฟอร์มการตรวจจับขั้นต่อไปล่วงหน้า และรักษาระดับความเข้มข้นของตัวทำละลายให้เท่ากันในกลุ่มควบคุมว่างเปล่าทั้งหมด