สารทำให้โปรตีนใส Carrez BC6680/BC6685 สำหรับกำจัดโปรตีนก่อนการวิเคราะห์ด้วย HPLC และเอนไซม์

การรบกวนจากโปรตีนอาจดูเหมือนปัญหาเล็กน้อยในแวบแรก แต่บ่อยครั้งที่ทำให้เสียเวลาในห้องปฏิบัติการไปหลายชั่วโมง ตัวอย่างอาจดูดีในตอนแรก แต่ต่อมาค่าพื้นหลังสูงขึ้น เส้นสอบเทียบไม่สม่ำเสมอ หรือเส้นฐานของ HPLC เปลี่ยนไป บางครั้งเจ้าหน้าที่สงสัยว่าเครื่องมือมีปัญหา แต่ในหลายกรณี สาเหตุที่แท้จริงอยู่ที่ขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างนั่นเอง

ปัญหานี้มักพบในผลิตภัณฑ์นม ผลิตภัณฑ์จากถั่วเหลือง ของเหลวทางชีวภาพ สารสกัดจากพืช และอาหารแปรรูปบางชนิด วัสดุเหล่านี้มีโปรตีน ไขมัน คอลลอยด์ และอนุภาคขนาดเล็ก เมื่อส่วนประกอบเหล่านี้ตกค้างอยู่ จะรบกวนการวิเคราะห์ด้วย HPLC การทดสอบเอนไซม์ และการอ่านค่า UV-Vis

สารให้ความกระจ่างโปรตีน Solarbio Carrez BC6680/BC6685 ผลิตภัณฑ์นี้ตอบโจทย์ความต้องการนี้ได้อย่างตรงจุด โดยใช้แนวทางที่ได้รับการยอมรับของ Carrez และสร้างตะกอนซิงค์เฟอร์โรไซยาไนด์ที่ดึงโปรตีนและคอลลอยด์ออกจากของเหลวที่มีน้ำเป็นตัวทำละลาย ห้องปฏิบัติการที่วัดแลคโตส กาแลคโตส กรดอินทรีย์ กรดอะมิโน น้ำตาล แอลกอฮอล์ หรืออัลดีไฮด์ จะพบว่าผลิตภัณฑ์นี้เป็นรีเอเจนต์ที่สะดวกสำหรับการใช้งานประจำวัน

เหตุใดการกำจัดโปรตีนจึงมีความสำคัญก่อนการทดสอบ

โปรตีนไม่ได้ทำให้เกิดความขุ่นที่เห็นได้ชัดเสมอไป ตัวอย่างอาจดูใสแต่ก็ยังมีโปรตีนและคอลลอยด์มากพอที่จะส่งผลต่อผลลัพธ์ได้ ในงาน HPLC โปรตีนที่ตกค้างอาจอุดตันคอลัมน์ เพิ่มแรงดันย้อนกลับ ทำให้รูปร่างของพีคผิดเพี้ยน และทำให้เส้นฐานเลื่อน ปัญหาอาจค่อยๆ เกิดขึ้น การฉีดสารตัวอย่างในช่วงแรกดูปกติ จากนั้นแรงดันจะสูงขึ้นและพีคจะกว้างขึ้น

ในการวิเคราะห์เอนไซม์ โปรตีนที่เหลืออยู่สามารถทำให้ค่าการอ่านพื้นหลังสูงขึ้นได้ เส้นกราฟการสอบเทียบจะไม่ตรง และการทดสอบซ้ำจะแสดงค่าที่กระจัดกระจายมากขึ้น ผลกระทบนี้จะรุนแรงขึ้นเมื่อสารเป้าหมายมีความเข้มข้นต่ำ ในการวิเคราะห์ด้วย UV-Vis ความขุ่นจะทำให้แสงกระเจิง เครื่องวัดจะบันทึกค่าที่ผสมสัญญาณของสารวิเคราะห์จริงกับสัญญาณรบกวนจากเมทริกซ์

ห้องปฏิบัติการบางแห่งใช้กรดไตรคลอโรอะซิติกหรือการปั่นเหวี่ยงความเร็วสูงเพื่อทำให้ตัวอย่างใสขึ้น ขั้นตอนเหล่านี้ได้ผลในบางกรณี แต่ก็อาจทำให้ค่า pH เปลี่ยนแปลงอย่างรวดเร็วหรือทิ้งโปรตีนที่ละลายน้ำได้ไว้ได้ การบำบัดด้วยวิธี Carrez ทำงานได้ภายใต้สภาวะที่อ่อนโยนกว่าและเหมาะสมกับกระบวนการทำงานของโมเลกุลขนาดเล็กหลายๆ วิธีมากกว่า

วิธีการทำงานของ Carrez I และ Carrez II

วิธีนี้ใช้สารละลายสองชนิด คือ คาร์เรซ 1 และคาร์เรซ 2 โดยเติมทีละชนิด สารละลายทั้งสองจะทำปฏิกิริยาภายในตัวอย่างเพื่อสร้างซิงค์เฟอร์โรไซยาไนด์ สารแข็งใหม่นี้จะจับกับโปรตีน ไขมัน และคอลลอยด์ผ่านการยึดเกาะที่พื้นผิวและการตกตะกอน เมื่อสารแข็งตกตะกอนลงมาแล้ว ของเหลวด้านบนจะใสพอสำหรับการทดสอบต่อไป

Solarbio เป็นผู้จัดหาอุปกรณ์ทั้งสองชิ้นนี้ บีซี6680/บีซี6685 สารเคมีชีวภาพ ค่า pH ที่เหมาะสมที่สุดอยู่ระหว่าง 7.5 ถึง 8.0 ในช่วงค่า pH นี้ ตะกอนจะก่อตัวอย่างต่อเนื่อง และของเหลวจะใสขึ้นในไม่กี่นาที เมื่อของแข็งปรากฏขึ้น ควรแยกออกโดยทันทีด้วยการปั่นเหวี่ยงหรือการกรอง การทิ้งไว้นานเกินไปอาจทำให้สารบางส่วนกลับคืนสู่สารละลายได้หากสภาวะเปลี่ยนแปลง

BC6680/BC6685 มีความสามารถด้านใดบ้าง

ความเร็วเป็นข้อได้เปรียบอย่างหนึ่ง ตัวอย่างส่วนใหญ่มีความใสที่ใช้งานได้ภายในสิบห้านาที ไม่จำเป็นต้องรอข้ามคืน ห้องปฏิบัติการที่ประมวลผลตัวอย่างอาหารหรือตัวอย่างทางชีวภาพจำนวนมากในแต่ละวันจะสังเกตเห็นการประหยัดเวลาได้อย่างชัดเจน

นอกจากนี้ ปฏิกิริยายังอ่อนโยน น้ำตาลและกรดอินทรีย์จะคงสภาพเดิมได้ดีกว่าเมื่อได้รับการบำบัดด้วยกรดเข้มข้น นั่นเป็นเหตุผลว่าทำไมวิธีการนี้จึงมักถูกนำมาใช้ก่อนการวัดแลคโตส กาแลคโตส หรือกรดแลคติก

หลังจากแยกของแข็งออกแล้ว ของเหลวจะถูกนำไปวิเคราะห์ด้วย HPLC ชุดเอนไซม์, และการวัดด้วยเครื่องสเปกโทรโฟโตมิเตอร์ การกรองซ้ำอีกครั้งผ่านตัวกรองขนาด 0.22 ไมโครเมตรก่อนฉีดเข้าเครื่อง HPLC จะช่วยเพิ่มการปกป้องคอลัมน์เมื่อตัวอย่างมีความซับซ้อน

การจัดเก็บทำได้ง่าย สารเคมีสามารถขนส่งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องภายใต้สภาวะปกติของห้องปฏิบัติการ ไม่จำเป็นต้องใช้การจัดเก็บในที่เย็นเป็นพิเศษสำหรับสต็อกทั่วไป

ตัวอย่างผลิตภัณฑ์นม: กรณีการใช้งานที่พบได้บ่อยมาก

การทดสอบผลิตภัณฑ์นม การวิเคราะห์ด้วยวิธีดังกล่าวใช้บ่อย นม โยเกิร์ต ชีส และผงเวย์ประกอบด้วยเคซีน โปรตีนเวย์ ไขมัน และคอลลอยด์ ส่วนประกอบเหล่านี้อาจรบกวนการวัดแลคโตส กาแลคโตส หรือกรดแลคติกในภายหลัง การกำจัดโปรตีนอย่างเหมาะสมจะทำให้ได้ของเหลวที่สะอาดกว่า ให้ผลการวัดที่คงที่กว่า และได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำกว่าในการทดสอบซ้ำ

ตัวอย่างผลิตภัณฑ์จากถั่วเหลืองและผลิตภัณฑ์จากพืช

นมถั่วเหลือง เต้าหู้ และเครื่องดื่มจากพืช ล้วนมีปัญหาที่คล้ายคลึงกัน โปรตีนถั่วเหลืองและคอลลอยด์จากพืชสามารถทำให้ปฏิกิริยาสีและร่องรอยการแยกสารด้วยโครมาโทกราฟีเปลี่ยนแปลงไปได้ การปั่นเหวี่ยงแบบธรรมดาบางครั้งอาจเหลือสารตกค้างมากพอที่จะทำให้ค่าที่ได้ผันผวน การบำบัดด้วยวิธี Carrez ช่วยลดการรบกวนบางส่วนและเพิ่มความชัดเจนก่อนการทดสอบน้ำตาลหรือกรดอะมิโน สารสกัดจากพืชที่มีสีเข้มอาจยังคงต้องมีขั้นตอนการกำจัดสีแยกต่างหาก เนื่องจากสารเคมีส่วนใหญ่จะมุ่งเป้าไปที่โปรตีนและคอลลอยด์มากกว่าเม็ดสี

ตัวอย่างทางชีวภาพและการวิจัยทางเภสัชกรรม

ซีรั่มและปัสสาวะมีอัลบูมินและโกลบูลินที่สามารถบดบังสัญญาณของโมเลกุลขนาดเล็กได้ BC6680/BC6685 สามารถใช้กับของเหลวทางชีวภาพบางชนิดได้ เมื่อเป้าหมายคือการกำจัดโปรตีนก่อนการวิเคราะห์เมตาบอไลต์ การวิจัยทางเภสัชกรรมวิธีการเดียวกันนี้ยังช่วยได้กับสารสกัดหรือตัวอย่างกระบวนการบางอย่าง การตรวจสอบการฟื้นตัวยังคงมีประโยชน์กับเมทริกซ์ใหม่ใดๆ ก็ตาม เนื่องจากรีเอเจนต์ส่วนเกินอาจดึงโมเลกุลเป้าหมายบางส่วนเข้าไปในของแข็งได้

จุดที่ห้องปฏิบัติการต้องระมัดระวัง

วิธีการนี้ไม่ได้เหมาะกับตัวอย่างทุกชนิด ตัวอย่างที่มีสีเข้มมักจะยังคงมีสีอยู่หลังการบำบัด อาจจำเป็นต้องกำจัดสีเพิ่มเติม นอกจากนี้ น้ำยาของ Carrez ยังอาจรบกวนการทดสอบกรดแอสคอร์บิก ซิเตรต ยูเรีย หรือแอมโมเนีย ตัวอย่างที่ต้องการวัดปริมาณเหล็กควรหลีกเลี่ยงวิธีการนี้ เนื่องจากปฏิกิริยาเคมีจะรบกวนการตรวจจับไอออนเหล็ก

ค่า pH ต้องอยู่ใกล้เคียง 7.5 ถึง 8.0 หากอยู่นอกช่วงนี้ การก่อตัวของของแข็งอาจไม่สมบูรณ์ หรือการกู้คืนสารเป้าหมายอาจลดลง ปริมาณที่เติมก็ต้องสมดุลเช่นกัน น้อยเกินไปจะทำให้โปรตีนตกค้างอยู่ มากเกินไปอาจทำให้โมเลกุลเป้าหมายถูกพัดพาไปกับของแข็ง การทดลองกู้คืนสารเป้าหมายอย่างรวดเร็วกับตัวอย่างชนิดใหม่จะช่วยกำหนดปริมาณที่เหมาะสมได้

ขั้นตอนการทำงานที่เรียบง่าย

ขั้นตอนโดยทั่วไปนั้นไม่ซับซ้อน เริ่มจากเตรียมสารสกัดจากน้ำและปรับค่า pH หากจำเป็น เติม Carrez I แล้วผสมให้เข้ากัน เติม Carrez II แล้วผสมอีกครั้ง ปล่อยให้เกิดการตกตะกอนของแข็ง ปั่นเหวี่ยงหรือกรองเพื่อเก็บของเหลวใสที่อยู่เหนือตะกอน ใช้ของเหลวนั้นสำหรับการวิเคราะห์ด้วย HPLC การทดสอบเอนไซม์ หรือการวิเคราะห์ด้วย UV-Vis การกรองครั้งสุดท้ายด้วยตัวกรองขนาด 0.22 ไมโครเมตรก่อนฉีดเข้าเครื่อง HPLC จะช่วยป้องกันคอลัมน์เมื่อตัวอย่างมีอนุภาคจำนวนมาก

เหตุใดจึงควรเลือก Solarbio Carrez Protein Clarifying Agent BC6680/BC6685

ห้องปฏิบัติการทั่วไปต้องการรีเอเจนต์ที่ใช้งานง่าย เก็บรักษาได้นาน และใช้ได้กับตัวอย่างหลายประเภท BC6680/BC6685 ตอบโจทย์เหล่านี้ได้ โดยจะกำจัดโปรตีนและคอลลอยด์ออกจากของเหลวที่มีน้ำเป็นตัวทำละลายก่อนการวิเคราะห์โมเลกุลขนาดเล็ก รีเอเจนต์นี้รองรับการทดสอบผลิตภัณฑ์นม ผลิตภัณฑ์จากถั่วเหลือง การเตรียมตัวอย่างทางชีวภาพ การตรวจสอบคุณภาพอาหาร การศึกษาเกี่ยวกับสารสกัดจากพืช และขั้นตอนทางเภสัชกรรมบางขั้นตอน

น้ำยาทำความสะอาดช่วยลดปัญหาที่อาจเกิดขึ้นในภายหลัง คอลัมน์มีอายุการใช้งานยาวนานขึ้น ค่าพื้นฐานของเอนไซม์อยู่ในระดับต่ำลง ค่าที่อ่านได้จากเครื่องสเปกโทรโฟโตมิเตอร์ได้รับผลกระทบจากแสงกระเจิงน้อยลง ประโยชน์ในทางปฏิบัติเหล่านี้จะสะสมเพิ่มขึ้นเรื่อยๆ ในระหว่างการใช้งานประจำวัน

ข้อสรุป

การรบกวนจากโปรตีนอาจทำให้วิธีการวิเคราะห์ที่น่าเชื่อถือดูเหมือนผิดพลาดได้ ค่าพื้นหลังสูง เส้นกราฟการสอบเทียบที่คดเคี้ยว เส้นฐาน HPLC ที่เปลี่ยนแปลง และข้อมูลการวิเคราะห์ซ้ำที่กระจัดกระจาย มักมีสาเหตุมาจากเมทริกซ์ของตัวอย่างมากกว่าเครื่องมือ สารทำให้ใสโปรตีน Solarbio Carrez BC6680/BC6685 ช่วยกำจัดโปรตีน ไขมัน และคอลลอยด์ออกได้โดยตรงก่อนทำการวัด

ตะกอนซิงค์เฟอร์โรไซยาไนด์จะทำให้ได้ของเหลวที่ใสกว่า เหมาะสำหรับการวิเคราะห์ด้วย HPLC การทดสอบเอนไซม์ และการวิเคราะห์ด้วย UV-Vis เมื่อใช้ร่วมกับค่า pH ที่เหมาะสม ปริมาณที่ถูกต้อง และการกำจัดของแข็งออกอย่างรวดเร็ว สารเคมีนี้จะช่วยให้ได้ผลลัพธ์ที่ราบรื่นยิ่งขึ้นในตัวอย่างผลิตภัณฑ์นม ถั่วเหลือง ผลิตภัณฑ์ชีวภาพ อาหาร และพืช หากต้องการเลือกผลิตภัณฑ์ ขอความช่วยเหลือในการเตรียมตัวอย่าง หรือสอบถามเกี่ยวกับสารเคมีจำนวนมาก โปรดติดต่อเรา ติดต่อ Solarbio เพื่อขอความช่วยเหลือเพิ่มเติม

คำถามที่พบบ่อย

Q1: สารทำให้โปรตีนใส Solarbio Carrez Protein Clarifying Agent BC6680/BC6685 ใช้สำหรับอะไร?
A1: ช่วยกำจัดโปรตีน ไขมัน และสารแขวนลอยออกจากตัวอย่างน้ำ ก่อนนำไปวิเคราะห์ด้วย HPLC การทดสอบเอนไซม์ การอ่านค่า UV-Vis และการทดสอบโมเลกุลขนาดเล็กอื่นๆ

คำถามที่ 2: เหตุใดจึงต้องใช้ Carrez I และ Carrez II ร่วมกัน?
A2: เฉพาะคู่สารดังกล่าวเท่านั้นที่จะเกิดเป็นสารประกอบสังกะสีเฟอร์โรไซยาไนด์ ซึ่งจะจับและกำจัดส่วนประกอบที่ไม่ต้องการออกไป

Q3: สามารถนำของเหลวใสที่ได้มาฉีดเข้าเครื่อง HPLC ได้โดยตรงหรือไม่?
A3: ในหลายกรณีก็ใช่ แต่การกรองด้วยตัวกรองขนาด 0.22 ไมโครเมตรก่อนฉีดสารจะช่วยกำจัดอนุภาคละเอียดและปกป้องคอลัมน์ได้

Q4: BC6680/BC6685 เหมาะสำหรับการทดสอบผลิตภัณฑ์นมหรือไม่?
A4: ใช่ค่ะ ใช้ได้กับนม โยเกิร์ต ชีส และผงเวย์ ก่อนการวัดปริมาณแลคโตส กาแลคโตส หรือกรดแลคติกค่ะ

Q5: สารเคมีนี้สามารถใช้กับผลิตภัณฑ์จากถั่วเหลืองได้หรือไม่?
A5: ใช่ค่ะ เครื่องนี้จะกำจัดโปรตีนถั่วเหลืองออกจากนมถั่วเหลือง เต้าหู้ และผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้อง ก่อนทำการทดสอบน้ำตาลหรือกรดอะมิโนค่ะ

Q6: ค่า pH ใดที่เหมาะสมสำหรับการกรองแบบ Carrez?
A6: ช่วง 7.5 ถึง 8.0 ให้การก่อตัวที่มั่นคงและเสถียร และการกู้คืนเป้าหมายที่ดี

Q7: ตัวอย่างใดบ้างที่ไม่เหมาะสำหรับกระบวนการทำให้ใสแบบ Carrez?
A7: ตัวอย่างที่มีสีเข้มอาจต้องใช้สารขจัดสีเพิ่มเติม การทดสอบกรดแอสคอร์บิก ซิเตรต ยูเรีย แอมโมเนีย หรือไอออนเหล็ก ต้องตรวจสอบแยกต่างหาก เนื่องจากสารเคมีเหล่านี้อาจรบกวนการทดสอบได้

คำถามที่ 8: การชี้แจงโดย Carrez สามารถแทนที่การตกตะกอนของ TCA ได้หรือไม่
A8: เป็นตัวเลือกที่อ่อนโยนกว่าในกระบวนการทำงานของสารโมเลกุลขนาดเล็กหลายๆ กระบวนการ เนื่องจากทำงานได้ใกล้เคียงกับค่า pH ที่เป็นกลาง และมีโอกาสน้อยที่จะทำอันตรายต่อเป้าหมายที่ไวต่อสารเคมี

Q9: เหตุใดจึงต้องตรวจสอบปริมาณน้ำยาสำหรับแต่ละตัวอย่าง?
A9: ระดับโปรตีนมีความแปรปรวน หากมีน้อยเกินไป โปรตีนจะยังคงอยู่ในของเหลว หากมีมากเกินไป โปรตีนอาจนำโมเลกุลเป้าหมายเข้าไปในของแข็งได้ การทดสอบการฟื้นตัวในระยะสั้นจะช่วยกำหนดปริมาณที่เหมาะสมได้

Q10: ควรจัดการกับตัวอย่างอย่างไรหลังจากเติมรีเอเจนต์ Carrez แล้ว?
A10: กำจัดของแข็งออกโดยการปั่นหรือกรองทันทีหลังจากที่มันก่อตัวขึ้น จากนั้นจึงนำของเหลวใสไปใช้ในขั้นตอนต่อไป