Осветляющее средство для белков Carrez BC6680/BC6685 для удаления белков перед ВЭЖХ и ферментативными анализами.

На первый взгляд, помехи от белков кажутся незначительной проблемой. Однако они часто приводят к пустой трате времени в лаборатории. Образец может казаться нормальным вначале. Позже фоновый сигнал повышается, калибровочная линия становится неровной, или смещается базовая линия ВЭЖХ. Иногда сотрудники сначала подозревают неисправность прибора. Во многих случаях истинная причина кроется на более раннем этапе, на этапе подготовки образца.

Эта проблема часто встречается в молочных продуктах, соевых продуктах, биологических жидкостях, растительных экстрактах и ​​некоторых переработанных пищевых продуктах. В этих материалах содержатся белки, жиры, коллоиды и мельчайшие частицы. Когда эти компоненты остаются в растворе, они нарушают работу ВЭЖХ-анализа, ферментных тестов и УФ-спектроскопии.

Осветляющий агент белка Solarbio Carrez BC6680/BC6685 Он отвечает именно этой потребности. Он использует проверенный метод Карреса и образует осадок ферроцианида цинка, который извлекает белки и коллоиды из жидкостей на водной основе. Лаборатории, измеряющие лактозу, галактозу, органические кислоты, аминокислоты, сахара, спирты или альдегиды, находят его удобным реагентом для повседневного использования.

Почему важно удалить белок перед проведением анализа

Белок не всегда вызывает заметное помутнение. Образец может выглядеть прозрачным, но при этом содержать достаточное количество белка и коллоида, чтобы повлиять на результаты. При работе с ВЭЖХ остатки белка могут засорять колонку, повышать противодавление, искажать форму пиков и сдвигать базовую линию. Проблемы могут нарастать постепенно. Первые инъекции выглядят нормально, затем давление повышается, и пики расширяются.

В ферментных анализах остаточный белок может повышать фоновый уровень. Калибровочная кривая становится менее прямой, и повторные измерения показывают больший разброс. Этот эффект усиливается при низкой концентрации целевого вещества. В УФ-спектроскопии мутность рассеивает свет. Прибор регистрирует значение, которое смешивает реальный сигнал аналита с матричным шумом.

В некоторых лабораториях для осветления образца используют трихлоруксусную кислоту или быстрое центрифугирование. Эти методы эффективны в определенных случаях. Однако они также могут резко изменить pH или оставить после себя растворимые белки. Обработка по методу Карреса работает в более мягких условиях и лучше подходит для многих методов работы с малыми молекулами.

Как работают системы Карреса I и Карреса II

Метод использует два раствора. Растворы Карреса I и Карреса II добавляются поочередно. Они реагируют внутри образца, образуя ферроцианид цинка. Новое твердое вещество связывает белки, жиры и коллоиды посредством поверхностного прикрепления и совместного осаждения. После осаждения твердого вещества жидкость над ним становится достаточно прозрачной для дальнейших исследований.

Компания Solarbio поставляет эту пару в качестве BC6680/BC6685 Биохимические реагенты. Оптимальный уровень pH находится в диапазоне от 7,5 до 8,0. В этом диапазоне осадок образуется постепенно, а жидкость становится прозрачной через несколько минут. После появления твердого вещества его следует незамедлительно удалить центрифугированием или фильтрацией. Слишком длительное выдерживание может привести к возвращению части вещества в раствор при изменении условий.

В чём преимущества BC6680/BC6685?

Одно из преимуществ — скорость. Большинство образцов достигают пригодной для использования прозрачности в течение пятнадцати минут. Не требуется ждать всю ночь. Лаборатории, которые ежедневно обрабатывают большое количество пищевых или биологических образцов, отмечают экономию времени.

Реакция также протекает в щадящем режиме. Сахара и органические кислоты сохраняют свою целостность лучше, чем при обработке сильной кислотой. Именно поэтому этот метод часто используется перед измерениями лактозы, галактозы или молочной кислоты.

После удаления твердого вещества жидкость анализируется методом ВЭЖХ. наборы ферментов, и спектрофотометрических измерений. Дополнительная обработка через фильтр с размером пор 0,22 микрометра перед введением образца в ВЭЖХ обеспечивает дополнительную защиту колонки при работе со сложными образцами.

Хранение простое. Реагенты транспортируются и хранятся при комнатной температуре в обычных лабораторных условиях. Для хранения стандартных запасов не требуется специальное холодильное хранилище.

Образцы молочной продукции: очень распространенный пример использования.

тестирование молочной продукции Это часто встречающаяся проблема. Молоко, йогурт, сыр и сухие молочные продукты содержат казеин, сывороточные белки, жиры и коллоиды. Эти компоненты легко искажают последующие измерения лактозы, галактозы или молочной кислоты. Правильное удаление белков позволяет получить более чистую жидкость, обеспечивающую более стабильные показания и лучшие результаты при повторных измерениях.

Соевые продукты и образцы растительного происхождения

Соевое молоко, тофу и растительные напитки представляют собой схожие проблемы. Соевые белки и растительные коллоиды могут изменять цветовые реакции и хроматографические кривые. Простое центрифугирование иногда оставляет достаточное количество материала, чтобы вызвать колебания результатов. Обработка по Каррезу уменьшает часть этих помех и улучшает прозрачность перед анализом на сахар или аминокислоты. Темные растительные экстракты могут по-прежнему нуждаться в отдельном этапе удаления цвета, поскольку реагент в основном воздействует на белки и коллоиды, а не на пигменты.

Биологические образцы и фармацевтические исследования

Сыворотка крови и моча содержат альбумин и глобулины, которые могут маскировать сигналы малых молекул. BC6680/BC6685 можно применять к некоторым биологическим жидкостям, когда цель состоит в удалении белков перед анализом метаболитов. фармацевтические исследованияАналогичный подход помогает при работе с определенными экстрактами или технологическими образцами. Проверка степени извлечения остается полезной для любой новой матрицы, поскольку избыток реагента может втянуть некоторые целевые молекулы в твердый раствор.

В каких случаях лабораториям следует проявлять осторожность

Этот метод подходит не для всех целей. Образцы с ярко выраженной окраской часто сохраняют свой цвет после обработки. Может потребоваться дополнительное удаление цвета. Реактивы Карреса также могут мешать проведению анализов на аскорбиновую кислоту, цитрат, мочевину или аммиак. Образцам, предназначенным для измерения содержания железа, следует избегать этого метода, поскольку химические реакции мешают обнаружению ионов железа.

Значение pH должно оставаться в пределах от 7,5 до 8,0. За пределами этого диапазона образование твердого вещества может быть неполным, или выход целевого вещества может снизиться. Количество добавляемого вещества также должно быть сбалансировано. Слишком малое количество оставляет белок, слишком большое может уносить целевые молекулы вместе с твердым веществом. Быстрая проба на новом типе образца поможет установить правильный объем.

Простой рабочий процесс

Типичная последовательность действий проста. Сначала подготовьте водный экстракт и при необходимости отрегулируйте pH. Добавьте Каррес I и перемешайте. Добавьте Каррес II и снова перемешайте. Дайте образоваться осадку. Центрифугируйте или отфильтруйте, чтобы собрать прозрачную жидкость над осадком. Используйте эту жидкость для ВЭЖХ, ферментного анализа или УФ-спектроскопии. Финальная фильтрация через фильтр 0,22 микрометра перед введением образца в ВЭЖХ защищает колонку, если образец содержит большое количество частиц.

Почему стоит выбрать осветляющее средство для белков Solarbio Carrez BC6680/BC6685?

Для стандартных лабораторных работ необходим реагент, который прост в использовании, стабилен при хранении и подходит для различных типов образцов. BC6680/BC6685 отвечает этим требованиям. Он удаляет белки и коллоиды из водных растворов перед анализом малых молекул. Реагент используется для анализа молочных продуктов, соевых продуктов, подготовки биологических образцов, проверки качества пищевых продуктов, исследований растительных экстрактов и на отдельных этапах фармацевтической деятельности.

Более чистые жидкости уменьшают количество проблем в дальнейшем. Колонки служат дольше. Фоновый уровень ферментов остается ниже. Показания спектрофотометра меньше подвержены влиянию рассеянного света. Эти практические преимущества суммируются в процессе ежедневной работы.

Вывод

Белковые помехи могут сделать надежные методы неэффективными. Высокий фоновый уровень, искаженные калибровочные линии, дрейф базовых линий ВЭЖХ и разбросанные данные повторных измерений часто объясняются матрицей образца, а не особенностями прибора. Осветляющее средство для белков Solarbio Carrez BC6680/BC6685 предлагает прямой способ удаления белков, жиров и коллоидов перед измерением.

Осадок ферроцианида цинка образует более прозрачную жидкость, подходящую для ВЭЖХ, ферментных анализов и УФ-спектроскопии. При использовании с правильным pH, необходимым объемом и быстрым удалением твердого вещества реагент помогает получить более качественные результаты при анализе молочных, соевых, биологических, пищевых и растительных образцов. Для выбора продукта, поддержки в подготовке образцов или запроса информации о поставках реагентов оптом, вы можете обратиться по адресу: связаться с Solarbio для получения дальнейшей помощи.

Часто задаваемые вопросы

В1: Для чего используется осветляющее средство для белков Solarbio Carrez BC6680/BC6685?
A1: Он удаляет белки, жиры и коллоидные вещества из образцов на водной основе перед проведением ВЭЖХ, ферментных анализов, УФ-спектроскопии и других анализов малых молекул.

В2: Почему Каррес I и Каррес II необходимо использовать вместе?
A2: Только эта пара образует твердое вещество ферроцианид цинка, которое связывает и удаляет нежелательные компоненты.

В3: Можно ли ввести осветленную жидкость непосредственно в ВЭЖХ?
A3: Во многих случаях да, однако фильтрация через сито с размером пор 0,22 микрометра перед инъекцией удаляет мелкие частицы и защищает колонку.

Вопрос 4: Подходит ли BC6680/BC6685 для анализа молочной продукции?
A4: Да. Это работает с молоком, йогуртом, сыром и сухим молочным сывороточным протеином до измерения лактозы, галактозы или молочной кислоты.

В5: Можно ли использовать этот реагент для анализа соевых продуктов?
A5: Да. Он удаляет соевый белок из соевого молока, тофу и подобных продуктов до проведения анализов на сахар или аминокислоты.

В6: Какой уровень pH рекомендуется для осветления по методу Карреса?
A6: Диапазон от 7,5 до 8,0 обеспечивает устойчивое твердое покрытие и хорошее извлечение цели.

В7: Какие образцы не подходят для осветления по методу Карреса?
A7: Для образцов с высокой интенсивностью окраски может потребоваться дополнительное удаление красителя. Для определения аскорбиновой кислоты, цитрата, мочевины, аммиака или ионов железа необходимы отдельные анализы, поскольку реагент может создавать помехи.

Вопрос 8: Может ли осветление Карреза заменить осаждение ТСА?
A8: Во многих рабочих процессах с малыми молекулами он служит более мягким вариантом, поскольку работает при нейтральном pH и с меньшей вероятностью повредит чувствительные мишени.

В9: Почему необходимо проверять дозировку реагента для каждого образца?
A9: Уровень белка варьируется. Слишком низкий уровень оставляет белок в жидкости. Слишком высокий уровень может перенести целевые молекулы в твердое вещество. Короткий тест на определение оптимального количества белка поможет установить правильный уровень.

В10: Как следует обращаться с образцом после добавления реактива Карреса?
A10: Удалите осадок центрифугированием или фильтрацией сразу после его образования, затем возьмите прозрачную жидкость для следующего шага.